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干貨!大幅提高蛋白產(chǎn)量,原來你是這樣的FectoPRO?!

作者:admin信息來源:達(dá)科為日期:2017年07月14日打印字體:  
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圖1. FectoPRO?大幅提高懸浮CHO細(xì)胞的抗體產(chǎn)量。按1×106個細(xì)胞/ml的密度將細(xì)胞培育在30ml的無血清培養(yǎng)基中,并依照每種試劑說明書推薦用量FectoPRO?(0.8 μg DNA/ml)或FreeStyle?MAX試劑(1.25 μg DNA/ml)進(jìn)行轉(zhuǎn)染。用蛋白質(zhì)G生物感應(yīng)器(fortéBIO? octet RED96 system)對重組小鼠IgG的產(chǎn)量監(jiān)測1~6天?!狿roteoGenix SAS(法國)提供的數(shù)據(jù)。

圖2. FectoPRO?大幅提高懸浮CHO和HEK-293細(xì)胞的蛋白產(chǎn)量。按1×106個細(xì)胞/ml的密度將FreeStyle? CHO-S和HEK-293F細(xì)胞培育在30 ml的無血清培養(yǎng)基中,并依照每種試劑說明書推薦用量FectoPRO?+FectoPRO?輔助藥劑Booster (0.4 μg DNA/ml)、FreeStyle?MAX試劑(1.25 μg DNA/ml)或PEIpro?(1 μg DNA/ml)進(jìn)行轉(zhuǎn)染。用蛋白質(zhì)G親和性定量法(HPLC)和Western Blot檢測轉(zhuǎn)染后72小時(CHO細(xì)胞)和120小時(HEK-293細(xì)胞)的IgG3-Fc (34 kDa)的產(chǎn)量。 

       高質(zhì)量質(zhì)粒DNA的制備成本非常高,尤其是在進(jìn)行大規(guī)模蛋白質(zhì)生產(chǎn)時需要大量的DNA和許多質(zhì)粒。FectoPRO?通過使用0.4~0.6 μg/106/ml的細(xì)胞培養(yǎng)液將DNA成本縮減了40%~60%,使其成為生物制藥生產(chǎn)流程的一項(xiàng)經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的選擇。 

       過去幾年,蛋白質(zhì)生產(chǎn)的持續(xù)時間有所增加,大部分蛋白質(zhì)生產(chǎn)過程持續(xù)1~2周,以獲得最佳的蛋白產(chǎn)量。FectoPRO?確保幾天內(nèi)產(chǎn)生持續(xù)的蛋白產(chǎn)量,同時保持較高的細(xì)胞活力以延長蛋白生產(chǎn)。

FectoPRO?介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染無需改變流程便可將細(xì)胞培養(yǎng)基按比例從30ml擴(kuò)展至數(shù)升。

FectoPRO?介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染無需改變流程便可將細(xì)胞培養(yǎng)基按比例從30ml擴(kuò)展至數(shù)升。

       FectoPRO?采用嚴(yán)格管控的生產(chǎn)流程進(jìn)行生產(chǎn)和配置,確保各實(shí)驗(yàn)結(jié)果的高度可重復(fù)性。此外,為了符合現(xiàn)行的監(jiān)管準(zhǔn)則,F(xiàn)ectoPRO?還采用了先進(jìn)的質(zhì)控流程,包括確保批次間的蛋白質(zhì)生產(chǎn)率有絕佳一致性的質(zhì)量指標(biāo)。

FectoPRO?和其它轉(zhuǎn)染試劑不同,它既適用于CHO細(xì)胞也適用于HEK293細(xì)胞。該試劑與多種培養(yǎng)基兼容,因此實(shí)驗(yàn)操作非常簡易。

FectoPRO?保證不含動物源成分,且限定化學(xué)成分。每個生產(chǎn)批次都經(jīng)過系統(tǒng)化的批次管理和出廠測試。采用先進(jìn)的質(zhì)控流程:蛋白質(zhì)生產(chǎn)率、細(xì)胞活性及完全無菌。

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